在silica硅膠色譜柱檢測(cè)分析過程中,silica硅膠色譜柱上被吸附的樣品成分累積到一定程度時(shí),就開始形成新的固定相。新的檢測(cè)物質(zhì)能與殘留雜質(zhì)作用形成一定的分離機(jī)理,從而導(dǎo)致保留時(shí)間波動(dòng),出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。隨著時(shí)間的積累,silica硅膠色譜柱的反壓就會(huì)超過泵所能承受的zui大壓力,使silica硅膠色譜柱無法工作以及在堵塞處產(chǎn)生空體積。
如何保證良好的silica硅膠色譜柱性能與柱壽命
認(rèn)證閱讀色譜柱使用說明書;
使用填充良好的色譜柱;
盡量減少壓力波動(dòng),避免機(jī)械及熱沖擊;
使用保護(hù)柱及在線過濾器;
經(jīng)常以強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱;
充分過濾樣品及流動(dòng)相,盡量避免雜質(zhì)微粒與強(qiáng)保留成分;
用穩(wěn)定的固定相(C18zui穩(wěn)定);
在中等PH值操作(6~8),用有機(jī)緩沖溶液;
色譜柱使用溫度小于40℃;
silica硅膠色譜柱,應(yīng)保持流動(dòng)相的PH值范圍在3.0~8.0;
在水流動(dòng)相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉;
流動(dòng)相中含有緩沖溶液,應(yīng)注意應(yīng)95∶5的水及有機(jī)溶劑過渡,有機(jī)溶劑不能低于5%;
過夜或貯存時(shí),沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機(jī)溶劑流動(dòng)相保存(乙晴)。