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網(wǎng)站首頁 ◇ 技術(shù)支持 ◇ 米粉中維生素D2、D3的檢測
維生素D（vitaminD）為固醇類衍生物，具抗佝僂病作用，又稱抗佝僂病維生素。維生素D家族成員中zui重要的成員是D2和D3。雖然日常膳食可補(bǔ)充部分維生素D，但仍有相當(dāng)一部分人面臨著維生素D攝入不足的問題，各種人為添加維生素D的食品便應(yīng)運(yùn)而生。因此，準(zhǔn)確測定各種食品中的維生素D含量顯得非常重要，科研工作者也一直在努力尋找合適的測定方法來得到準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的結(jié)果。
迪馬科技應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室采用ProElutVDC維生素D2、D3固相萃取柱進(jìn)行前處理凈化，DiamonsilC18（2）液相色譜柱成功實(shí)現(xiàn)米粉中維生素D2、D3的分離、測定，具有分析結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好的特點(diǎn)。
樣品準(zhǔn)備
（1）取1g樣品，加入10mL水，充分混勻；
（2）加入1mL二甲基亞砜、5mL甲醇和20mL正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，渦旋混合2min，6000rpm離心2min，收集上清液；
（3）向下層殘?jiān)幸来渭尤?mL二甲基亞砜、5mL甲醇和10mL正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，重復(fù)提取兩次，合并三次提取上清液；
（4）將上清液在40℃下減壓蒸至近干，待凈化。
SPE柱凈化——ProElutVDC2g/12mL（Cat.#：65358）
| （1）活化： | 依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，棄去流出液； |
| （2）上樣： | 再用5 mL正己烷分兩次洗滌旋蒸瓶并加入柱中，棄去流出液； |
| （3）淋洗： | 依次向柱中加入10mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷,棄去流出液； |
| （4）洗脫： | 向柱中加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液； |
| （5）重新溶解： | 將洗脫液在40 ℃減壓蒸至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。 |
| 色譜柱： | Diamonsil C18(2),250mm×4.6mm,5μm（Cat# 99603） |
| 流 速： | 1.0 mL/min |
| 檢測器： | UV 264 nm |
| 柱 溫： | 30 ℃ |
| 進(jìn)樣量： | 20 μL |
| 流動(dòng)相： | 甲醇 |
| 目標(biāo)化合物 | 維生素D2 | 維生素D3 |
| 回收率（%） | 84.69 | 87.42 |
米粉中維生素D2、D3（添加水平2.0mg/kg）色譜圖
米粉中維生素D2、D3（空白）色譜圖
米粉中維生素D2、D3的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息：
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| 樣品前處理 | ||
| 65358 | 維生素D2、D3檢測柱 | 2 g/12 mL,20/pk |
| ProElut VDC | ||
| 244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
| 4806 | 考克（控制流量） | 15/pk |
| 99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
| 99013 | 抽濾瓶套裝 | 1/pk |
| （包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞） | ||
| 37177 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22μm 100/pk |
| 37180 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45μm 100/pk |
| 色譜柱及保護(hù)柱 | ||
| 99603 | 通用型反相液相色譜柱 | 250×4.6 mm,5μm |
| Diamonsil C18（2） | ||
| 6201 | EasyGuard保護(hù)柱套裝 | 1個(gè)柱套+2個(gè)柱芯 |
| 10 × 4.0 mm | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | ||
| 12-N-V17-100MG | 維生素D2[50-14-6] | 100 mg |
| 12- N-11463-100MG | 維生素D3[67-97-0] | 100 mg |
| HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對(duì)試劑 | ||
| 50102 | 甲醇HPLC級(jí) | 4 L |
| 50104 | 乙酸乙酯HPLC級(jí) | 4 L |
| 50115 | 正己烷HPLC級(jí) | 4 L |
| 50119 | 二甲基亞砜HPLC級(jí) | 4 L |
| 50123 | 甲基叔丁基醚HPLC級(jí) | 4 L |
| 通用色譜產(chǎn)品 | ||
| 52401B | 瓶架/藍(lán)色 | 50 孔 |
| 52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
| 5323 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL,100/pk |
| 5325 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
| H80465 | HPLC 進(jìn)樣針 | 25 μL |
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